抗體寡核苷酸偶聯(lián)AOC技術(shù)的基礎(chǔ)研究應(yīng)用

藥物開發(fā)領(lǐng)域里，寡核苷酸已經(jīng)廣泛應(yīng)用于靶向基因治療的研究。自2018年1月起FDA已批準(zhǔn)多款產(chǎn)品上市，早期批準(zhǔn)的產(chǎn)品以皮下和靜脈內(nèi)給藥為主，皮下施用的Kynamro利用寡核苷酸在肝臟和腎臟中積累的趨勢；靜脈內(nèi)給藥的Exondys 51利用杜氏肌營養(yǎng)不良患者肌肉細(xì)胞攝取增加的趨勢。

基礎(chǔ)研究中，低豐度蛋白怎樣能進(jìn)行精確和有效檢測？抗體-寡核苷酸 (Ab-oligo) 偶聯(lián)物技術(shù)，是一個不錯的選擇，現(xiàn)已被用于從診斷到治療的眾多應(yīng)用中。Ab-oligo 偶聯(lián)物在強(qiáng)化多項生物技術(shù)方面發(fā)揮著重要作用，這些技術(shù)包括免疫學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究、生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)、臨床診斷（包括即時護(hù)理）及其他新型技術(shù)。因為寡核苷酸具有多個官能團(tuán)，所以抗體可以通過氨基酸殘基輕松地與寡核苷酸偶聯(lián)，因此適用于大多數(shù)體外應(yīng)用。

抗體-寡核苷酸偶聯(lián)物應(yīng)用

1.免疫聚合酶鏈反應(yīng) (immuno-PCR)

與 ELISA 類似，免疫 PCR 也是一項利用抗體檢測和定量混合樣本中特定抗原（分析物） 的強(qiáng)大技術(shù)。但是，在免疫 PCR 中，Ab-oligo 偶聯(lián)物會與固定分析物結(jié)合，然后通過 RT-PCR 使附著的 DNA 擴(kuò)增。

在免疫 PCR 中使用 Ab–oligo 偶聯(lián)物，可以提高蛋白檢測和定量的靈敏度；由于它融合了抗體的檢測特異性和 RT-PCR 的核酸檢測靈敏度，因此明顯優(yōu)于一般的 ELISA 法。20 多年來，將免疫檢測與 RT-PCR 進(jìn)行結(jié)合已成為一項標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。

由于免疫 PCR 具有強(qiáng)大的擴(kuò)增能力，而且特異性和靈敏度更高，高出 ELISA 100-10,000 倍，因此檢測的下限更低，擴(kuò)增產(chǎn)物可以通過凝膠電泳進(jìn)行觀察，從而確定結(jié)合分析物是否存在。

2.多重檢測開發(fā)

多重蛋白檢測有助于定量使用通用捕獲技術(shù)同時測定多個樣本中的多種目標(biāo)分析物，從而減少工作流程和樣本量問題。但是，這種檢測方法受到檢測特異性、靈敏度和通量等因素的限制。

開展多重免疫檢測的方法有很多，大致可分為兩類：在固體表面固定，每種分析物在獨立的空間內(nèi)進(jìn)行檢測；固定于磁珠或顆粒上，每種分析物在不同的磁珠/顆粒上進(jìn)行檢測。如今，多重蛋白檢測技術(shù)利用 DNA 兩條互補(bǔ)鏈之間的特異性結(jié)合，將每種同源物對應(yīng)的一條鏈（分析物）固定在固體支持物上，例如微量滴定板。將 Ab-oligo 偶聯(lián)物合并，并與孔內(nèi)的特定固定捕獲寡核苷酸雜交，從而創(chuàng)建抗體陣列。

MajicLink oligo-antibody conjugation Kit寡核苷酸偶聯(lián)試劑盒的特點和優(yōu)勢：

-反應(yīng)迅速、操作簡單，30 分鐘即可激活抗體和寡核苷酸，1 小時即可完成寡核苷酸偶聯(lián)，無需具備專業(yè)科學(xué)知識，省時省力

-清潔程序穩(wěn)定、靈活（適用于抗體片段和其他蛋白），抗體或者蛋白均可

-抗體和寡核苷酸回收率高，可幫您節(jié)省寶貴的試劑

-單向化學(xué)，消除了交聯(lián)的風(fēng)險

-共價鍵形成的偶聯(lián)物高度穩(wěn)定

-適用于含 10-120 個堿基對的單鏈寡核苷酸，含多達(dá) 80 個堿基對的雙鏈寡核苷酸

-連接化學(xué)發(fā)生在 5' 端和 3' 端的末端，可以與其他修飾結(jié)合