懸浮細胞如何固定做免疫熒光等后續(xù)實驗？

懸浮細胞呈現(xiàn)懸浮狀態(tài)生長，如何固定？是所有后續(xù)實驗的第一步，也是關(guān)鍵的一步，也是難倒很多人的的一步。靶點科技懸浮細胞專用固定玻片Shi-Fix，提供全新的痛點解決方案。L-多聚賴氨酸等傳統(tǒng)老掉牙的作坊式方法被詬病，被淘汰。

您是否希望懸浮細胞的免疫熒光像貼壁細胞一樣容易？現(xiàn)在就是這樣！靶點科技Shi-Fix懸浮細胞免疫熒光專用玻片直擊痛點。

細胞免疫熒光主要用于蛋白定位研究，相互作用研究和細胞信號轉(zhuǎn)導研究。細胞免疫熒光就是將免疫學方法和熒光標記技術(shù)相結(jié)合，研究特異性抗原在細胞內(nèi)的分布。細胞免疫熒光特性高，敏感性強，速度快，主要原理也是利用抗原抗體反映抗原抗體結(jié)合后再用熒光標記，通過顯微鏡下觀察來確定某種特異性抗原是否存在。

根據(jù)培養(yǎng)的細胞類型，可分為貼壁細胞和懸浮細胞（淋巴細胞，血液的白細胞）。貼壁細胞有天然貼壁的屬性，而懸浮細胞不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長。

免疫熒光實驗的基礎(chǔ)前提就是讓細胞能固定在玻片上。懸浮細胞如何貼壁或者固定到玻片上，是業(yè)內(nèi)科研人員面對的一個難題。傳統(tǒng)上，或用細胞離心甩片機制備細胞片或直接涂片法制備細胞涂片，然后把細胞片于乙醇或丙酮或多聚甲醛固定。無論甩片還是涂片，都是黑盒子實驗。每個人操作手法不一樣，即使同一個人操作，每一批實驗，也都沒法評價細胞片上的細胞固定的情況，而這一步至關(guān)重要。盲目而又沒底的只能硬著頭皮往下做。浪費的不僅是時間，還有抗體等很多試劑。如何解決這些痛點？懸浮細胞免疫熒光專用玻片Shi-Fix Coverslips帶來痛點解決方案！

您是否希望懸浮細胞的免疫熒光像貼壁細胞一樣容易？現(xiàn)在就是這樣！

靶點科技Shi-fix玻片允許懸浮細胞分層或直接作為單層生長。簡單，無憂的實驗方案，無需離心即可將懸浮細胞固定到載玻片上。只需將細胞添加到載玻片上，等待30分鐘，用PBS洗滌未結(jié)合的細胞并繼續(xù)免疫染色（或繼續(xù)培養(yǎng)以獲得所需的細胞密度）。

這些玻片也可用于染色懸浮細胞以進行顯微鏡檢查，或用于固定懸浮細胞以進行共聚焦顯微鏡檢查。更重要的是，如果需要，您還可以在細胞附著在玻片上時刺激它們。您可以像貼壁細胞一樣處理非貼壁細胞！

簡單四步法固定懸浮細胞

1. 使用 PBS 清洗細胞，并將細胞重新懸浮于 PBS 中(2-5 百萬個/ml)

2. 把懸浮細胞專用免疫熒光玻片放置于12孔或者6孔細胞培養(yǎng)板孔里，直接滴加細胞于懸浮細胞專用免疫熒光玻片上(每個玻片上 20-30 萬個細胞)

3. 使細胞附著30分鐘，有些細胞需要延長附著時間，但不要超過1小時。使用約 2ml PBS沖洗掉未結(jié)合細胞(切勿直接垂直滴加PBS到玻片上的細胞，可將 PB滴加于板孔側(cè)邊，然后輕輕搖晃 3-5分鐘)

4. 在顯微鏡下檢查細胞附著情況，如果需要進一步培養(yǎng)，那么加入 1ml培養(yǎng)基即可;若不培養(yǎng)即可直接固定，染色。

懸浮細胞固定免疫熒光圖