懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞基礎(chǔ)知識(shí)介紹

體外培養(yǎng)細(xì)胞，根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長(zhǎng)的特性，可分為懸浮型和貼壁型兩大類(lèi)。

（一）懸浮型細(xì)胞

簡(jiǎn)稱(chēng)懸浮細(xì)胞。在體外培養(yǎng)時(shí)，這些細(xì)胞屬于非貼壁依賴(lài)的細(xì)胞，這些細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)膜也會(huì)與培養(yǎng)液底發(fā)生黏連，但最多不超過(guò)5％的表面與培養(yǎng)液底發(fā)生類(lèi)似于細(xì)胞連接樣的黏連，顯微視場(chǎng)下細(xì)胞往往呈球形。

懸浮型細(xì)胞主要是來(lái)源于血液、淋巴組織的細(xì)胞，骨髓瘤構(gòu)建的各種雜交瘤細(xì)胞，某些腫瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞。

細(xì)胞呈圓形，一般不貼于支持物上，呈懸浮生長(zhǎng)。這類(lèi)細(xì)胞容易大量繁殖。

體外培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型中，少數(shù)細(xì)胞種類(lèi)在培養(yǎng)時(shí)不貼附于支持物上，而以懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，包括一些取自血、脾或骨髓的原代細(xì)胞，尤其是血液白細(xì)胞，以及一些腫瘤細(xì)胞。某些來(lái)源于此類(lèi)細(xì)胞的細(xì)胞株或細(xì)胞系也呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)。

細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)時(shí)可以呈單個(gè)細(xì)胞或細(xì)小的細(xì)胞團(tuán)，胞體為圓形。其優(yōu)點(diǎn)是在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)，生存空間大，允許長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)，便于大量繁殖。

屬于懸浮型細(xì)胞常見(jiàn)的細(xì)胞株系有小鼠腹水瘤S180、小鼠骨髓瘤NS1和SP2/0，人造血系腫瘤細(xì)胞U937（見(jiàn)文章結(jié)尾圖片）、HL60、K562（見(jiàn)文章結(jié)尾圖片）等。技術(shù)詳情聯(lián)系靶點(diǎn)科技技術(shù)支持。

（二）貼壁型細(xì)胞

簡(jiǎn)稱(chēng)貼壁細(xì)胞。在體外培養(yǎng)時(shí)，貼壁型細(xì)胞就是那些貼壁依賴(lài)的細(xì)胞，在匯合成單層生長(zhǎng)以前，它們的細(xì)胞質(zhì)膜超過(guò)30％的表面與培養(yǎng)液底發(fā)生類(lèi)似與細(xì)胞連接樣的黏連，顯微視場(chǎng)下細(xì)胞一般為扁平狀的各種形態(tài)。需要注意的是，貼壁型細(xì)胞匯合生長(zhǎng)形成單層以后，失去接觸抑制的那些細(xì)胞株或細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)物中，常?？梢?jiàn)或多或少的懸浮樣細(xì)胞出現(xiàn)。

貼壁型細(xì)胞包括大多數(shù)哺乳動(dòng)物的淋巴和血液以外的組織細(xì)胞，以及多數(shù)腫瘤細(xì)胞。需要貼附在帶適量正電荷的固體或半固體表面才能正常生長(zhǎng)和分裂。
大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞均為貼壁型，它們必須貼附在支持物表面生長(zhǎng)，這類(lèi)細(xì)胞在體內(nèi)時(shí)各自具有其特殊的形態(tài)，但在體外培養(yǎng)時(shí)貼附于支持物后形態(tài)上表現(xiàn)單一化而失去體內(nèi)原有的某些特征，多呈上皮樣或成纖維細(xì)胞樣。

正常貼壁型細(xì)胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性，細(xì)胞相互接觸后可抑制細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，因此細(xì)胞不會(huì)相互重疊于其上面生長(zhǎng)。細(xì)胞生長(zhǎng)、匯合成片后，雖發(fā)生接觸抑制，但只要營(yíng)養(yǎng)充分，仍可增殖分裂，但當(dāng)細(xì)胞數(shù)量達(dá)到一定密度后，由于營(yíng)養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響，細(xì)胞分裂停止，稱(chēng)為密度抑制。

腫瘤細(xì)胞的接觸抑制及密度抑制往往減弱或消失，因此細(xì)胞可向三維空間發(fā)展，導(dǎo)致細(xì)胞堆積，并可生長(zhǎng)至較高的終末細(xì)胞密度。

貼壁細(xì)胞類(lèi)型有以下幾種常見(jiàn)類(lèi)型

1．成纖維細(xì)胞型

細(xì)胞呈梭形、扇形、星形或不規(guī)則三角形，中央有卵圓形核，胞質(zhì)常向外伸出3-5個(gè)長(zhǎng)短不一的突起，生長(zhǎng)時(shí)呈放射狀。細(xì)胞匯合過(guò)程中，細(xì)胞的生長(zhǎng)呈放射狀、火焰狀或漩渦狀。

除了真正的成纖維細(xì)胞外，凡由中胚層間充質(zhì)起源的組織，如心肌、平滑肌、成骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮等常呈成纖維細(xì)胞形態(tài)。培養(yǎng)中細(xì)胞的形態(tài)與成纖維細(xì)胞類(lèi)似時(shí)皆可稱(chēng)之為成纖維細(xì)胞（圖10-2)。

2．上皮型細(xì)胞

細(xì)胞呈扁平不規(guī)則多邊形，中央有圓形核，細(xì)胞外觀透明，細(xì)胞彼此緊密相連成單層生長(zhǎng)。生長(zhǎng)時(shí)呈膜狀移動(dòng)，處于膜邊緣的細(xì)胞總與膜相連，很少單獨(dú)行動(dòng)。起源于內(nèi)、外胚層的細(xì)胞如皮膚表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形態(tài)。上皮細(xì)胞傳代培養(yǎng)后形態(tài)特征逐漸趨于典型。

3．游走細(xì)胞型

呈散在生長(zhǎng)，一般不連成片，胞質(zhì)常突起，呈活躍游走或變形運(yùn)動(dòng)，速度快且方向不規(guī)則。此型細(xì)胞不穩(wěn)定，有時(shí)難以和其他細(xì)胞相區(qū)別。起源于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的細(xì)胞屬于此類(lèi)型。

4．多型細(xì)胞型

有一些細(xì)胞，如神經(jīng)細(xì)胞難以確定其規(guī)律和穩(wěn)定的形態(tài)，統(tǒng)歸于此類(lèi)。此類(lèi)細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)，其形態(tài)結(jié)構(gòu)容易受培養(yǎng)條件（基質(zhì)、溫度、pH、營(yíng)養(yǎng)、污染狀況和培養(yǎng)方式等）影響。

如角膜上皮細(xì)胞在膠原基質(zhì)上的形態(tài)與體內(nèi)天然形態(tài)相似，但在塑料基質(zhì)表面細(xì)胞呈單層生長(zhǎng)，細(xì)胞呈扁平形。上皮型Hela細(xì)胞在偏酸或偏堿的培養(yǎng)環(huán)境下會(huì)停止生長(zhǎng)，細(xì)胞形態(tài)呈梭形、不規(guī)則形，及時(shí)糾正pH后，細(xì)胞又恢復(fù)原來(lái)的正常形態(tài)。

盡管懸浮細(xì)胞無(wú)須消化，但是對(duì)于有些實(shí)驗(yàn)，需要像貼壁細(xì)胞一樣固定懸浮細(xì)胞，困擾了很多實(shí)驗(yàn)人員，于是有了細(xì)胞掉片一說(shuō)。靶點(diǎn)科技懸浮細(xì)胞固定專(zhuān)用玻片Shi-Fix，給這個(gè)困擾提供了解決方案。無(wú)論您是要固定懸浮細(xì)胞做免疫熒光，還是固定懸浮便于刺激，亦或固定懸浮細(xì)胞用于接觸反應(yīng)。靶點(diǎn)科技都能給您提供方案，期待您的咨詢(xún)。