主要有兩種基本的細胞培養(yǎng)體系,一種是使細胞在人工基質(zhì)上單層生長(如貼壁培養(yǎng)),另一種是使細胞在培養(yǎng)基中自由漂浮生長(懸浮培養(yǎng))。
每種培養(yǎng)類型的特征
除造血細胞系和其他一些細胞外,大多數(shù)脊椎動物細胞均具有貼壁依賴性,必須在合適的基質(zhì)上培養(yǎng),且該基質(zhì)必須經(jīng)過特殊處理,以便細胞附著和鋪展(即經(jīng)組織培養(yǎng)處理)。然而,許多細胞系也可采用懸浮培養(yǎng)。同樣,大多數(shù)市售昆蟲細胞系在單層或懸浮培養(yǎng)中生長良好。
懸浮培養(yǎng)細胞可在未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),但隨著培養(yǎng)物體積與表面積之比(通常為0.2 – 0.5 mL/cm2)的增加,阻礙了氣體的充分交換,因此需要對培養(yǎng)基進行攪拌。這種攪拌一般通過磁力攪拌器或旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)瓶實現(xiàn)。
貼壁細胞培養(yǎng) | 懸浮細胞培養(yǎng) |
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適用于大多數(shù)細胞類型,包括原代培養(yǎng) | 適用于適應(yīng)懸浮培養(yǎng)的細胞和一些其他非粘附性細胞系(例如,造血細胞細胞系) |
需要定期傳代,但可在倒置顯微鏡下輕松進行目視檢查 | 更容易傳代,但需要每日進行細胞計數(shù)和存活率測定以遵循生長模式;可稀釋培養(yǎng)物以刺激生長 |
通過酶解(例如,Gibco™ TrypLE™ Express、胰蛋白酶)或機械解離細胞 | 不需要酶或機械解離 |
生長受表面積的限制,可能會限制產(chǎn)品產(chǎn)量 | 生長受培養(yǎng)基中的細胞濃度限制,便于擴大規(guī)模 |
需要經(jīng)組織培養(yǎng)處理的容器 | 可在未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)容器中維持培養(yǎng),但需要攪拌(即振蕩或攪拌),以實現(xiàn)充分的氣體交換 |
用于細胞學、持續(xù)收獲產(chǎn)品和多種研究應(yīng)用 | 用于大量蛋白生產(chǎn)、批量收獲和多種研究應(yīng)用 |
懸浮細胞如何能像貼壁細胞一樣?好固定能便于后續(xù)實驗操作,比如免疫熒光。解決掉片的痛點就是使用ShiFix懸浮細胞免疫熒光專用玻片,就四步,搞定掉片難題。
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